А. Соловьев - 250 показателей здоровья Страница 32

Цвет. Желтый цвет (ксантохромия), а также буровато-коричневый бывает следствием наличия продуктов распада гемоглобина. Различают застойную и геморрагическую ксантохромию. Застойная ксантохромия – результат замедления тока крови в сосудах мозга, что приводит к проникновению плазмы в ликвор. Геморрагическая ксантохромия обусловлена попаданием крови в ликворное пространство (старым кровоизлиянием) и сочетается с эритрохромией. Очень редко желтая окраска может быть обусловлена приемом лекарственных веществ, например пенициллина.

Красный цвет придает ликвору примесь неизмененной крови (эритрохромия), которая может быть результатом кровоизлияния.

Зеленоватая окраска ликвора может возникать при окислении билирубина в биливердин или при примеси гноя, в последнем случае ликвор становится мутным. Мутность спинномозговой жидкости зависит от присутствия большого количества форменных элементов, фибриногена, микроорганизмов.

Фибринозная пленка образуется в ликворе при большом содержании фибриногена. Следует иметь в виду, что фибриновая пленка выпадает только на поверхности жидкости, образуя мешочек, наполненный жидкостью. При микроскопическом исследовании в свернувшемся фибрине можно видеть клеточные элементы, а при туберкулезном менингите иногда обнаружить микобактерии туберкулеза (см. табл. 3).

Таблица 3

Унифицированный метод определения белка с сульфосалициловой кислотой и сульфатом натрия

Принцип. Интенсивность помутнения при коагуляции белка сульфосалициловой кислотой пропорциональна его концентрации.

Реактивы:

1) 6 %-ный раствор сульфосалициловой кислоты;

2) 14 %-ный раствор безводного сульфата натрия. Для анализа используют свежеприготовленную смесь равных объемов этих реактивов (рабочий раствор);

3) стандартный раствор альбумина – 1 %-ный раствор: 1 г лиофилизированного альбумина (из человеческой или бычьей сыворотки) растворяют в небольшом количестве 0,9 %-ного раствора хлорида натрия в колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствором хлорида натрия до метки. Реактив нестойкий, поэтому для стабилизации к стандартному раствору прибавляют 1 мл 5 %-ного раствора азида натрия (NaNз). При этом с условием хранения в холодильнике реактив годен к употреблению в течение 2 месяцев; 1 мл раствора содержит 10 мг альбумина;

4) 0,9 %-ный раствор хлорида натрия.

Необходимое оборудование: фотоэлектроколориметр.

Ход реакции. В пробирку наливают 5 мл свежего рабочего раствора и 0,5 мл ликвора и перемешивают. Через 10 мин. интенсивность помутнения определяют на фотоэлектроколориметре в кювете с длиной оптического пути 1 см против контроля, длина волны 410–480 нм (сине-фиолетовый светофильтр). В качестве контроля вместо реактива используется 0,9 %-ный раствор хлорида натрия. Расчет ведется по калибровочному графику. Построение калибровочного графика: из стандартного раствора готовят разведения и обрабатывают их, как опыт. В 5 пробирок вносят соответственно 0,05; 0,1; 0,2; 0,5 и 1 мл стандартного раствора альбумина и в каждую из них добавляют до объема 10 мл 0,9 %-ного раствора хлорида натрия. Концентрация белка в этих растворах составляет соответственно 0,05; 0,1; 0,2; 0,5 и 1 г/л.

Перед опытом рекомендуется поставить реакцию Панди (качественную пробу на белок), и если результат реакции характеризуется как 3+ или 4+ – значит, белка много. Нормальное содержание белка в ликворе из желудочков мозга 0,12– 0,2 г/л, из большой цистерны – от 0,1 до 0,22 г/л, при люмбальной пункции – от 0,22 до 0,33 г/л.

Повышение содержания белка отмечают при нарушении гемодинамики, органических поражениях ЦНС и оболочек мозга, воспалительных процессах. Наиболее характерно увеличение концентрации белка для экстрамедуллярно расположенных опухолей спинного мозга. Пониженное содержание белка в ликворе наблюдают при гиперсекреции ликвора и гидроцефалии.

Белок спинномозговой жидкости состоит из альбуминов и глобулинов, отношение глобулинов к альбуминам колеблется в пределах 0,2–0,3.

Унифицированный метод определения глобулинов осаждением карболовой кислотой (реакция Панди)

Принцип. Реакция основана на осаждении глобулинов насыщенным раствором карболовой кислоты.

При положительном результате в месте соприкосновения реактива со спинномозговой жидкостью возникает молочно-белое облачко, переходящее в муть. Для обозначения результатов реакции Панди используется система четырех плюсов: слабая опалесценция – 1+, заметная опалесценция – 2+, умеренное помутнение – 3+, существенное помутнение – 4+.

Необходимо помнить, что реакция Панди осаждает такие белковые фракции, которые остаются не осажденными в реакции Ноне – Апельта, поэтому рекомендуется ставить обе реакции одновременно.

Способ Стольникова (см. табл. 4)

Таблица 4

Методика постановки реакции Ланге Различают 4 типа характера реакции Ланге:

1) нормальный;

2) дегенеративный, характеризующий патологические процессы в паренхиме мозга;

3) воспалительный, наблюдающийся при менингеально-сосудистых воспалительных процессах;

4) смешанный (дегенеративно-воспалительный).

Принцип. Метод основан на сравнении уровня гемоглобина в периферической крови и спинномозговой жидкости.

Содержание сахара в спинномозговой жидкости в среднем равно 60 мг%; как правило, оно составляет 50–60 % сахара крови. Содержание сахара в жидкости из желудочков несколько выше, чем в жидкости из цистерн, а в последней выше, чем в люмбальной жидкости. При острых и подострых менингитах содержание сахара снижено. При туберкулезном менингите содержание сахара может колебаться от едва заметного количества до 42 мг%, но полное отсутствие сахара при этом заболевании является редкостью. При стрептококковом и менингококковом менингите глюкоза может практически отсутствовать. Увеличенное содержание сахара в ликворе при нормальном содержании его в крови наблюдается при мозговых процессах с явлениями раздражения (генуинной эпилепсии, энцефалитах). При опухолях мозга может наблюдаться как увеличение, так и снижение содержания сахара ликвора. Во избежание разложения определение сахара в спинномозговой жидкости нужно производить как можно быстрее, не позднее чем через 3–4 ч после взятия.

Для определения сахара в спинномозговой жидкости можно использовать любой из методов, принятых для определения сахара в крови.

Йодометрический способ Хагедорна и Йенсена (см. табл. 5)

Принцип.

1) Осаждение белков.

2) Определение сахара.

Таблица 5

Унифицированный метод подсчета количества форменных элементов

Принцип. При помощи микроскопа и счетной камеры определяют число в ликворе лейкоцитов после разрушения эритроцитов.

Нормальное содержание лейкоцитов (цитоз) в 3 мкл ликвора следующее: в жидкости из желудочков мозга – 0–3 клетки, в жидкости из большой цистерны – 0–2 клетки, в жидкости, полученной при люмбальной пункции, – 7—10 клеток. У детей цитоз выше, чем у взрослых, и с возрастом снижается; если у ребенка до 3 месяцев в 1 мкл находится 20–23 клетки, а к году 14–15 клеток, то их число снижается приблизительно на 1 клетку за год жизни и к 10 годам составляет 4–5 клеток в 1 мкл.

Повышенный цитоз (плеоцитоз) наблюдают при органических поражениях вещества мозга и воспалительных поражениях мозговых оболочек.

Количество эритроцитов подсчитывают в счетной камере Горяева или Фукса – Розенталя. Эритроциты обнаруживаются в прозрачной бесцветной жидкости. При наличии 900—1000 эритроцитов в 1 мкл наблюдается легкая опалесценция жидкости, при наличии 2000 эритроцитов отмечается едва заметное розовое окрашивание, при наличии 4000–5000 эритроцитов жидкость носит геморрагический характер. Для диагностики внутричерепного кровоизлияния значение имеет не только количество эритроцитов, но и нарастание их численности при исследовании спинномозговой жидкости в динамике.

Дифференциация клеточных элементов в счетной камере

В счетной камере с сухой системой (окуляр 15Х или 10X, объектив 40Х) можно различить почти все клеточные элементы. Реактив окрашивают ядра клеток в красновато-фиолетовый цвет, при этом цитоплазма остается бесцветной.